结痂时必做的真菌组织病理学检查的步骤:
1.采集标本:
浅部真菌的标本有毛发、皮屑、甲屑、痂等,标本在分离前常先用 75%的乙 醇消毒。深部真菌的标本可根据情况取痰、尿液、粪便、脓液、口腔或阴道分泌物、血液、脑脊液、各种穿刺液和活检组织,采集标本时应注意无菌操作。
2.检查方法:
(1)直接涂片:为最简单而重要的诊断方法。取标本置玻片上,加一滴 10%KOH 溶液, 盖上盖玻片,在酒精灯火焰上稍加热,待标本溶解,轻轻加压盖玻片使标本透明即可镜检。可用于检查有无菌丝或孢子,但不能确定菌种。
(2)墨汁涂片:用于检查隐球菌及其他有荚膜的孢子。方法是取一小滴墨汁与标本(如脑脊液)混合,盖上盖玻片后直接镜检。
(3)涂片或组织切片染色:涂片染色可更好地显示真菌形态和结构。革兰染色适用于白念珠菌、孢子丝菌等,瑞氏染色适用于组织胞浆菌,组织切片通常用 PAS 染色,多数真菌可 被染成红色。
(4)培养检查:可提高真菌检出率,并能确定菌种。标本接种于葡萄糖蛋白胨琼脂培养基上,置室温或 37℃培养 1~3 周,必要时可行玻片小培养协助鉴定。菌种鉴定常根据菌落 的形态及显微镜下形态判断,对某些真菌,有时尚需配合其他鉴别培养基、生化反应、分子 生物学方法确定。
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