确诊单纯疱疹可依据免疫学检测，核酸检测和病理检查做出准确判断。具体的检查方式如下：
1.免疫学检测
(1)抗原检测：用免疫酶方法(EIA)、免疫荧光法(1FA)及乳胶凝集试验等方法可进行HSV的抗原检测.具有较高的特异性和敏感性，可用于临床诊断和病毒鉴定。
(2)抗体检测：HSV—l亚型和HSV-2亚型的抗体检测是临床上最常用的HSV感染检测方法，有更高的特异性和敏感性。常用的是以ELIsA法检测抗HSV糖蛋白gG的抗体，抗HSV gG-IgM抗体阳性握示有现症感染，抗HSVgG-IgG抗体阳性提示曾有HSV感染。
2.核酸检测
(1)PER检测：PCR技术有较高的特异性和敏感性，可在数小时内做出检测报告，但易产生假阳性，且需要特殊的仪器和试剂，在基层医院尚未广泛采用。应注意在操作过程中避免污染，必要时加做确认实验例如桉酸分子杂交，甚至限制酶酶切分析，以排除PCR技术所可能导致的佃阳性反应。
(2)核酸分子杂交：DNA探针作为一种HSV检测手段具有先进性和准确性，虽然其特异性很高，但敏感性相对较低.需要的实验条件及技术要求较高，一般不作为常规检测。
3.病理检查
将疱疹液、皮肤黏膜病灶刮取物或活检组织用荧光素标记或酶标记单克隆抗体进行免疫荧光染色或免疫组化染色，用荧光显微镜或光学显微镜可快速检测细胞内HSV特异性抗原。此外，病损处刮片的细胞学检查或病理组织活检可查见多核巨细胞及细胞核内嗜酸性包涵体，可有助于本病的诊断，但不能仅以此作为确诊的依据。
