目前最常用的电解质紊乱实验方法是电枉法(ISE),它具有快速、准确、灵敏、操作简便等特点。电解质紊乱的电枉检查又分为直接法测定(标本不稀释)和间接法测定(标本稀释)。直接法直接用血清或全血,准确性高,但电极寿命短,间接法用稀释的血清为样品,准确性受稀释因素的影响,为确保诊断的准确性在具体操作时需要注意很多事项。
【实验原理】样品和标准液送人电极管道。当被测离子接触电极、发生迁移、产生电势,可根据电势产生大小测定离子浓度高低。Na电极用多维玻璃膜是长期性,K电极用缬氢霉素膜。
【试剂】
以美国Beckman公司SYNCHRONEL-ISE钾、钠、氯分析仪所用试剂为例:
稀释液:Tris-磷酸盐0.15mol/L。
参比液:钠140.0mmol/L,钾4.Ommol/L,氯100.0mmol/L。
二氧化碳10.0mmol/L,钙2.0mmol/L,锂1.0mmol/L。
校正液:开瓶后稳定30天,不开封稳定至瓶上标注有效期。
【操作】
自动或半自动仪器都要严格按照操作说明进行,注意以下几点:
①全血或血浆标本建议用肝素抗凝,血清和血浆标本都应及时分离,否则细胞内外离子的交换将影响测定结果的准确性。尿、脑脊液标本应先离心再测定,以保持电极的清洁。
②线形、准确度和精密度:好的电极钠和钾的线性可达100~200mmol/L(尿10~200mmol/L)和1.0~15.0mmol/L(尿2.0~200mmol/L),精密度CV<3%(尿小于5%)。
③校准:校准对于ISE测定的准确性非常重要,自动化高的仪器可以自动定时校准,一般是二到三个水平浓度校正。半自动仪器也应按时校正。
④电极的维护保养:电极的寿命跟测定标本数及维护保养有关,要经常用厂家提供的清洁液冲洗流动池和电极头,要避免测定样品中的纤维蛋白堵塞管道或沉积在膜表面。
⑤电极更换应严格按操作说明进行。冲洗和稀释用水要用去离子水,避免水中离子的干扰。
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