骨髓中的白血病细胞浸润有时却能进入外周血循环中,通常白细胞的总数会增加,超过每升(4--10)x10^9/l 。但是有时它会受到骨髓基质细胞及其它因素的影响而滞留于骨髓中,不易进入外周血循环,外周血白细胞数不增加。白细胞有的正常,有的减少,其确切的原因至今还不十分明确。各种类型急性白血病患者的白细胞数常正常或低于正常。慢性白血病,不论是粒细胞型还是淋巴细胞型,白细胞数通常是增加的,其中慢性粒细胞白血病大多超过100×x10^9/l,甚至达700~800×x10^9/l,下面介绍检查白血病细胞浸润的过程。
一、血清白细胞介素8检查过程:
1.包被兔抗人IL-8IgG(1μg/ml),以碳酸盐缓冲液稀释,加入酶标板各孔中,50μl/孔。4℃过夜。
2.封闭 用洗液(PBS-0.05% Tween20)洗板3次,加入封闭液(含2%牛血清白蛋白的PBS)200μl/孔,37℃2h。
3.加样 加入待检样品和系列稀释的rIL-8标准品,50μl/孔,所有样品及各稀释度标准品均为复孔或三孔,37℃1h。
4.洗板3次,加入生物素化兔抗IL-8IgG(35μg/ml)50μl/孔,37℃温育30min。
5.洗板3次,加入1∶5000稀释的亲和素-HRP,100μl/孔,37℃温育30min。
6.洗板3次,加入底物液100μl/孔,室温显色5min,每孔加入50μl 2mol/L H2SO4终止反应.
7.用酶标仪测A490nm。
二、骨髓象分析检查过程:
1.选择穿刺部位。
2.麻醉。
3.固定穿刺针长度。
4.医生左手拇指和示指固定穿刺部位,右手持骨髓穿刺针与骨面垂直刺入,若为胸骨穿刺则应与骨面成30o~40o角刺入。当穿刺针针尖接触骨质后,沿穿刺针的针体长轴左右旋转穿刺针,并向前推进,缓缓刺入骨质。
5.抽取骨髓液拔出穿刺针针芯,接上干燥的注射器(10m1或201m1),用适当的力量抽取骨髓液。当穿刺针在骨髓腔时,抽吸时会感到有尖锐酸痛,随即便有红色骨髓液进入注射器。抽取的骨髓液一般为0.1~0.2ml。
来源资料:《中华血液学杂志》 2004年 第7期
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